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收到冻存管怎么处理?

1)将恒温水浴锅中的水预热到37℃;

2)准备一支15ml离心管,加入5ml含10% FBS的完全培养基,放入37℃水浴锅中预热;

3)戴上护目镜,厚毛线手套后,从液氮罐中取出要复苏的细胞,尽快转入37℃恒温水浴锅中复温晃动冻存管以提高复温速率;

4)将融化了的冻存管中的细胞吸入事先准备的离心管中,混匀后,1000 rpm离心5min;

5)准备一个T-25培养瓶,写上细胞名称、日期,再加入4ml完全培养基;

6)离心完成后弃去上清,用1ml完全培养基重悬细胞后,转入T-25细胞培养中,混匀后转入CO2培养箱中培养静置。

注意:从液氮中取出细胞冻存管时,若冻存管内有液氮进入,需拧松冻存管,排出内部残留的液氮,之后拧紧冻存管,置于干冰上,然后放入37℃水浴中,避免温差太大造成液氮快速气化而爆炸。

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